Aplicaciones de los péptidos
La cromatografía de fase
inversa es el método de limpieza de péptidos más versátil y ampliamente
utilizado. Con los métodos tradicionales, la fase captura moléculas hidrófilas
polares que se eluyen diferencialmente al aumentar la concentración de
disolventes polares en la fase móvil. Las moléculas hidrófobas son capturadas
por la fase estacionaria y su tiempo de retención es función de la
hidrofobicidad de la partícula y de la fase móvil. Para la purificación de
péptidos, la producción
de anticuerpos policlonales separa los péptidos
objetivo de las impurezas de las etapas de síntesis, como isómeros, arreglos de
deleción y productos peptídicos de reacciones secundarias con grupos de
acoplamiento y protección que han sufrido reacciones de cadena lateral. La
pureza del péptido se mide como una fracción del péptido objetivo a las
impurezas que se acumulan en la longitud de onda de absorción del enlace
peptídico, y hay varios niveles de pureza disponibles en función de los
péptidos que se utilizarán:
>95 %: estudios
cuantitativos, estudios de unión de ligandos a receptores, producción de
anticuerpos monoclonales y estudios in vivo
>80%: detección de alto rendimiento,
bloqueo no cuantitativo en análisis inmunohistoquímicos y de transferencia
Western, estudios de sustrato no cuantitativos, limpieza de afinidad de
anticuerpos y recubrimiento de placas para complemento celular
>70 %: estándares, ensayos y producción
de anticuerpos policlonales
Aplicaciones de los péptidos sintéticos
La invención de la
síntesis de péptidos impulsó el desarrollo de diversas áreas de aplicación en
las que se utilizan péptidos sintéticos, incluido el desarrollo de anticuerpos
específicos contra proteínas patógenas, el estudio de los propósitos de las
proteínas y la identificación y caracterización de proteínas. Además, los
péptidos sintéticos se utilizan para estudiar las interacciones de los sustratos
dentro de importantes clases de enzimas, que desempeñan un papel vital en la
señalización celular. En la unión del receptor o el reconocimiento del
sustrato, la especificidad de las enzimas descubiertas recientemente se puede
estudiar utilizando conjuntos de péptidos sintéticos. Los péptidos sintéticos
pueden parecerse a los péptidos naturales y actuar como medicamentos para las
principales enfermedades. Por último, los péptidos sintéticos se utilizan como
estándares y reactivos en aplicaciones basadas en espectrometría de masas. Los
péptidos sintéticos juegan un papel dominante en la caracterización y
cuantificación de proteínas, particularmente aquellas que sirven como
biomarcadores de enfermedades
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